近日，中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所邱麗華研究員創(chuàng)新團隊對斑節(jié)對蝦E3泛素連接酶TRIM50-like在抗白斑綜合征病毒先天免疫中的作用及其分子機制方面的研究取得新進展，相關(guān)研究成果以“Identification of a Shrimp E3 Ubiquitin Ligase TRIM50-Like Involved in Restricting White Spot Syndrome Virus Proliferation by Its Mediated Autophagy and Ubiquitination”為題，發(fā)表在Frontiers in Immunology（Impact Factor 5.085）上，趙超為第一作者，邱麗華為通訊作者。該研究成果是邱麗華研究員創(chuàng)新團隊在“對蝦等海洋無脊椎動物先天免疫”領(lǐng)域系列研究之一，獲得國家重點研發(fā)計劃（2018YFD0900103）和國家自然科學(xué)基金（42006113)）等項目資助。

隨著對蝦養(yǎng)殖集約化程度的提高，病害問題日益凸顯，其中對蝦白斑綜合征病毒（WSSV）已成為全球?qū)ξr養(yǎng)殖業(yè)所面臨的危害性最大的病毒之一。TRIM家族蛋白的抗病毒作用在高等動物中已被充分論證，但在以對蝦為代表的水產(chǎn)無脊椎動物中卻鮮有報道。邱麗華創(chuàng)新團隊通過研究，從斑節(jié)對蝦克隆并鑒定了一種TRIM50-like基因，并將其命名為PmTRIM50-like。通過qRT-PCR和Western blotting檢測發(fā)現(xiàn)，PmTRIM50-like對蝦在腸道和胃組織中的相對表達量較高；受到WSSV刺激后，PmTRIM50-like蛋白及其mRNA在腸道和血細胞中顯著上調(diào)表達，表明PmTRIM50-like可能參與WSSV感染過程；當(dāng)PmTRIM50-like的表達被干擾后，對蝦體內(nèi)的VP28在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平的表達量明顯增加，WSSV病毒的拷貝數(shù)顯著增加，對蝦的存活率顯著下降。過表達實驗結(jié)果表明，當(dāng)過表達對蝦體內(nèi)的PmTRIM50-like mRNA后，對蝦體內(nèi)的VP28在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平的表達量明顯減少，WSSV病毒的拷貝數(shù)也顯著降低。這說明PmTRIM50-like在斑節(jié)對蝦體內(nèi)參與抑制WSSV的復(fù)制。Western blotting、透射電鏡和免疫細胞熒光化學(xué)實驗結(jié)果均表明，WSSV或細胞自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素刺激能誘導(dǎo)對蝦細胞自噬的發(fā)生；而細胞自噬在對蝦內(nèi)被證明起抑制WSSV復(fù)制的作用。當(dāng)干擾PmTRIM50-like的表達后，結(jié)果顯示W(wǎng)SSV或劑雷帕霉素誘導(dǎo)的細胞自噬作用被明顯抑制。這說明斑節(jié)對蝦PmTRIM50-like參與正向調(diào)節(jié)細胞自噬的發(fā)生。進一步實驗結(jié)果表明，干擾PmTRIM50-like的表達后，雷帕霉素誘導(dǎo)的對蝦細胞自噬被抑制，從而失去抑制WSSV復(fù)制的作用。這說明PmTRIM50-like可能通過正向調(diào)節(jié)細胞自噬來參與抑制WSSV病毒的復(fù)制。最后，通過Pull-down和體外泛素化實驗，進一步證明了PmTRIM50-like可以識別并泛素化WSSV的囊膜蛋白VP24、VP26和VP28。綜合以上結(jié)果，該研究表明PmTRIM50-like可能通過自身介導(dǎo)的細胞自噬和泛素化來參與抑制WSSV的復(fù)制。

全文鏈接https://doi.org/10.3389/fimmu.2021.682562。