日前,由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所院級(jí)海水池塘養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境調(diào)控創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)蘇浩昌、曹煜成等發(fā)明的“一種同時(shí)檢測(cè)養(yǎng)殖對(duì)蝦五種典型病原的多重巢式PCR擴(kuò)增引物及試劑盒”獲得國家發(fā)明專利授權(quán),專利號(hào)為ZL 2019 1 0371699.5。該發(fā)明可為對(duì)蝦健康養(yǎng)殖過程病害防控與監(jiān)測(cè)提供技術(shù)支持。
該發(fā)明公開的一種同時(shí)檢測(cè)養(yǎng)殖對(duì)蝦五種典型病原的多重巢式PCR擴(kuò)增引物,包括五種病原十足目虹彩病毒(SHIV)、蝦肝腸孢蟲(EHP)、對(duì)蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)、傳染性皮下及造血器官壞死病毒(IHHNV)和急性肝胰腺壞死病副溶血弧菌(VPAHPND)的引物組,還包含上述引物的試劑盒以及采用上述引物檢測(cè)五種病原的非疾病檢測(cè)目的多重巢式PCR檢測(cè)方法。
該發(fā)明通過設(shè)計(jì)外擴(kuò)和內(nèi)擴(kuò)引物,優(yōu)化并確定外擴(kuò)和內(nèi)擴(kuò)反應(yīng)的退火溫度、dNTP、EX Taq enzyme、五種對(duì)蝦病原引物的PCR反應(yīng)濃度等參數(shù),一方面可保證滿足同時(shí)檢測(cè)對(duì)蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)危害較大的SHIV、EHP、WSSV、IHHNV和VPAHPND等五種典型病原的需求,另一方面可達(dá)到較高的靈敏度。
