日前,由中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所海水養(yǎng)殖生物疾病控制與分子病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室發(fā)明的“一種可常溫保存和運(yùn)輸?shù)暮怂岬葴財(cái)U(kuò)增反應(yīng)試劑”、“基于凝膠的核酸等溫?cái)U(kuò)增試劑的保存方法”、“基于凝膠的多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)試劑保存方法及反應(yīng)試劑”和“基于多孔材料的多聚酶鏈反應(yīng)試劑保存方法及反應(yīng)試劑”相繼獲得國(guó)家發(fā)明專(zhuān)利授權(quán),專(zhuān)利號(hào)分別為:ZL 201210179864.5、ZL 201210178918.6、ZL 201210178919.0和ZL 201210192845.6。
在過(guò)去的20年里,以多聚酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)為代表的核酸擴(kuò)增技術(shù)得到了迅猛發(fā)展和應(yīng)用;最近幾年產(chǎn)生了一系列新型的核酸等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),這些技術(shù)或基于DNA/RNA生物合成機(jī)制研究的新發(fā)現(xiàn),或利用具有特殊功能的核酸酶來(lái)實(shí)現(xiàn)恒溫條件下對(duì)目標(biāo)核酸的擴(kuò)增;PCR以及新出現(xiàn)的核酸等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)在病原微生物檢測(cè)中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。但是,基于上述核酸擴(kuò)增技術(shù)的產(chǎn)品在大規(guī)模應(yīng)用過(guò)程中卻面臨一些問(wèn)題的困擾,其中最為突出的是產(chǎn)品需要低溫冷凍保存和運(yùn)輸。在低溫冷凍條件下進(jìn)行運(yùn)輸和保存,一方面增加了運(yùn)輸成本,另一方面也限制了這些產(chǎn)品在不具備低溫保存條件的環(huán)境或地區(qū)的應(yīng)用。黃海所海水養(yǎng)殖生物疾病控制與分子病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室利用天然多孔材料,能夠提供納米孔包埋活性基團(tuán)、人工凝膠材料,可以包埋生物大分子的特性,有效解決了PCR和等溫?cái)U(kuò)增體系常溫長(zhǎng)期保存這一難題。
“一種可常溫保存和運(yùn)輸?shù)暮怂岬葴財(cái)U(kuò)增反應(yīng)試劑”、“基于凝膠的核酸等溫?cái)U(kuò)增試劑的保存方法”和“基于凝膠的多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)試劑保存方法及反應(yīng)試劑”三項(xiàng)專(zhuān)利創(chuàng)造性地運(yùn)用低熔點(diǎn)瓊脂糖實(shí)現(xiàn)了酶促反應(yīng)體系中生物大分子的常溫固態(tài)包埋和酶最適溫度釋放(凝膠熔化為液態(tài)),為實(shí)現(xiàn)酶促核酸擴(kuò)增反應(yīng)體系的常溫長(zhǎng)期保存提供了一種有效手段。“基于多孔材料的多聚酶鏈反應(yīng)試劑保存方法及反應(yīng)試劑”專(zhuān)利則利用多孔材料包埋生物大分子活性基團(tuán)或整個(gè)分子實(shí)現(xiàn)了PCR反應(yīng)體系的常溫長(zhǎng)期保存。上述方法具有低成本、簡(jiǎn)便、處理后的擴(kuò)增反應(yīng)試劑混合物在常溫條件下活性穩(wěn)定持久等優(yōu)點(diǎn),上述方法的發(fā)明將有力促進(jìn)PCR和核酸等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)在醫(yī)療、檢驗(yàn)及檢疫等領(lǐng)域的推廣應(yīng)用。
目前,上述發(fā)明涉及的技術(shù)已開(kāi)始整合到該實(shí)驗(yàn)室建立的“病原微生物現(xiàn)場(chǎng)快速高靈敏檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)”中,并在該實(shí)驗(yàn)室所研發(fā)的十余種水產(chǎn)動(dòng)物病原現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)試劑盒中應(yīng)用。