日前，由中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所孫謐研究員等申報(bào)的“一種適冷性海洋酵母Bohai Sea-9145低溫堿性脂肪酶基因、氨基酸序列及重組脂肪酶”獲國(guó)家發(fā)明專利授權(quán)，專利號(hào)為ZL201110314848.8。

本發(fā)明的主要內(nèi)容是：從渤海海泥中篩選到的一株能夠分泌低溫堿性脂肪酶的適冷性海洋酵母菌株(Bohai Sea-9145)中，利用簡(jiǎn)并引物聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)與cDNA末端快速擴(kuò)增(RACE)相結(jié)合的方法克隆得到了一條編碼低溫堿性脂肪酶(LipY)的基因。該基因含有一個(gè)1206bp的開(kāi)放閱讀框(ORF)，編碼401個(gè)氨基酸，在氨基端含有一個(gè)28個(gè)氨基酸的信號(hào)肽。編碼的氨基酸含有脂肪酶的保守序列(G-X-S-X-G)和1個(gè)潛在的N-糖基化位點(diǎn)。將此脂肪酶基因克隆到真核表達(dá)載體(pIC9K)上，在巴斯德畢赤酵母(GS115)中進(jìn)行異源表達(dá)。以甲醇作為誘導(dǎo)劑，發(fā)酵96小時(shí)后在上清液中獲得了高活力的重組脂肪酶。利用鎳離子親和柱對(duì)重組脂肪酶進(jìn)行純化，得到了電泳純的脂肪酶樣品。該重組脂肪酶具有低溫催化活力高、堿性條件下性能穩(wěn)定等一系列優(yōu)點(diǎn)，在日化、紡織及食品加工等低溫催化領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景。